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高效液相色谱对茶叶及茶多酚中儿茶素的含量多瓦

2020-09-17 16:58:07来源:励志吧0次阅读

高效液相色谱对茶叶及茶多酚中儿茶素的含量

中国茶网资讯:摘要:茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。其中以黄烷醇类物质(儿茶素)最为重要。

摘要

采用VERTEX STI 5000等度和梯度高效液相色谱仪分析茶多酚中的儿茶素和咖啡因

前言

茶叶中儿茶素类化合物是茶叶中含量较丰富的一类功能性活性成分,在新茶中的质量分数(以干叶计)为 1 2 %~ 3 2 %。由于具有广泛的保健和药理功效以及较强的食品抗氧化特性,茶叶中儿茶素近年来已成为医药和食品研究领域的热点之一,本文采用上海禾工VERTEX STI 5000分析茶叶及茶多酚中儿茶素,方便,准确,快速。

实验部分

本实验在VERTEX STIP5000高压恒流泵、UV5000紫外可见检测器、Rheodyne 7725i高压进样阀、Vertex AQ-C18. 色谱柱上完成色谱条件

色谱柱: Vertex AQ-C18 5μm 4.6×200 mm

流动相: 等强度洗脱为CH3OH-H2O-TFA(体积比为25∶75∶0.05)

梯度洗脱的流动相A为甲醇,流动相B为体积分数为0.05%的TFA水溶液,梯度程序为22%A(4 min) 11 min40%A(6 min)4 min22%A。A的体积分数恒定在22%(即处于初始状态)平衡5 min,以便下一次进样。

流 速: 1.0mL/min

柱 温: 35℃

检测波长: 278 nm或210 nm

样 品: 西湖龙井,世纪茶多酚Ⅰ号

标 准 品: EGC,D-C,EC,EGCG和ECG,纯度均为98%

进样量: 20μL

结果与讨论图1龙井茶样在Vertex AQ-C18柱上的色谱分离图

Fig.1 Chromatogram of Longjing Tea on Vertex AQ-C18column

Mobile phase: methanol-water-trifluoro acetic acid (25∶75∶0.05,V/ V); detection wavelength:278 nm; flow rate:1 mL/min;column temperature:35℃.

Peak identification:1.EGC;2.D-C;3.EGCG;4.EC;5.CAF;6.GCG;7.ECG.

Fig.2 Chromatogram of catechins in Century Green Tea PolyphenolⅠon Vertex AQ-C18column

Mobile phase:A,methanol, B,0.05% trifluoro acetic acid solution; elution procedure: 22% A(4 min)11 min40% A(6 min)4 min22%A;detection wavelength:210 nm

Peak identification:8.CG; others are same as in Fig.1.

样品制备

茶 叶样 准确称取1 g左右的干茶叶样品于250 mL烧杯中,倒入200 mL左右已煮沸的超纯水,并把烧杯保温于95℃左右的热水浴中,每隔30s搅拌一次,持续浸提10 min。取出烧杯,适当冷却后用普通定性滤纸过滤,并用少量超纯水洗涤烧杯和残渣2~3次,过滤洗涤液,将滤液全部转入250mL容量瓶中。待瓶内溶液完 全冷至室温时,用水定容至刻度,摇匀。取此茶浸提液3.00 mL于10mL容量瓶中,用体积比为70∶30∶0.05的CH3OH-H2O-TFA混合液稀释至刻度,过滤后通过Sep-pakC18小柱,流出液用 0.5μm微孔膜过滤后作HPLC分析。

茶多酚样 准确称取50 mg左右样品于100 mL容量瓶中,用体积比为1∶1的CH3OH-H2O混合溶液溶解并定容至刻度,通过Sep-pak C18小柱处理后,再用0.5μm微孔膜过滤,滤液供HPLC分析使用。

结论

用杭州奥希的VERTEX STI 5000等度高效液相色谱仪分析茶叶及茶多酚中儿茶素,方便,准确,快速。

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